1. 第一财经首页
  2. 投稿

海外医疗 核酸纯度测定一般会夹杂其他分子

出国就医 • • 投稿

在分子肿瘤学中，主要的质控指标是核酸的产量和纯度。核酸降解程度的评估很重要，因为样本中核酸的高度降解，会造成假阴性结果。海外医疗服务机构爱诺美康介绍到，DNA降解的标志是抽提的DNA中，存在有大M的低分子质量核酸，可通过琼脂糖凝胶电泳分离并用溴化乙锭（EB）染色观察到。

而RNA降解的检验，则可通过凝胶分离染色，通过条带亮度来半定量检测18S和28S核糖体RNA的比例。海外医疗中，另一个较为重要的质控步骤，是核酸纯度的测定，一般采用的核酸提取方法，都会使产物中夹杂一些其他的分子。如蛋白、小分子化合物等，尤其是它们在高浓度时，可能会抑制后续检测。

海外医疗 核酸纯度测定一般会夹杂其他分子

要检测核酸纯度，可采用分光光度计等测定其紫外可见吸光度。DNA及RNA的紫外吸收峰值在260nm处，而蛋白质的吸收峰值则为280nm，DNA及RNA的260/280nm吸光度佳比值范围分别是1.8~1.9及1.9〜2.0。蛋白质等污染物过多，可导致该比值降低，而比值低于1.6时，则有必要重新提取过程使样品进一步纯化。

海外医疗服务机构爱诺美康介绍到，紫外吸收法也可以用来检测有机溶剂和杂质，吸光度在325nm提示溶液中有颗粒物，或使用了脏的比色杯；而吸光度在230nm则提示存在含肽键或芳香基团的污染物，如尿素和苯酚。纯度高的核酸在230nm读值不应超过0.3，且325nm读值不应超过0.016。因此，若样本读值明显偏离上述标准，海外医疗过程则应当重新纯化。

通常每个单位的260mm吸收值，相当于50jxg/ml的双链DNA、STpg/ml单链DNA或40jxg/ml的单链RNA。海外医疗过程中，核酸定M必不可少，可有助于判断提取的DNA或RNA的量，是否可以满足后续检测所需要的小量。例如，骨组织通常有较高的钙，在提取时需要脱钙，通常采用酸或螯合剂（如EDTA）来进行脱钙，后者是核酸提取中的首选。

原创文章，作者：出国就医，如若转载，请注明出处：https://baike.d1.net.cn/1358676.html

赞 (0)
出国就医出国就医
0 0
上一篇 2022-03-28 15:17
下一篇 2022-03-28 15:17

相关推荐