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去美国看病 如何评价测序的整体质量及用处

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国外方面，为验证测序的性能，在每一次检测中应设置阳性和阴性扩增对照。阳性扩增对照可以验证扩增失败，是否是由于样品本身的原因。去美国看病在每次检测中，对每个PCR反应缓冲液，都应设置阴性对照或空白无模板对照，确保没有发生外源性DNA的污染。

在Sanger测序数据分析之前，应首先评估测序峰图的质量。质量指标主要包括测序峰图的振幅和峰图的背景。峰值的振幅应足够高，这样才可以识别出灵敏度范围内的低水平突变，EGFR缺失突变检测，应低于每个横跨感兴趣区域核苷酸信号主峰值强度的5%。去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，此外，整个检测中的信噪比应低于2.5%，并且对于评价测序的整体质量也十分有用。

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尽管可以采取一些措施，以保证测序峰图的质量，但依然存在无法消除的低水平背景，因此，强烈建议采用双向测序。双向测序可大大降低因测序过程中，背景噪声或聚合酶失真而产生假阳性结果的风险。在每一批去美国看病的检测中，也应设置阴性对照以进一步区分背景信号，和真正的突变信号。由于存在主观性，需要1名以上的人员分别对测序结果，进行分析并达成共识。

去美国看病服务机构爱诺美康介绍到，假如对样品的突变状态无法达成共识，且剩余足够的样品，可重复检测以确定检测结果。也可以从同一标本中，重新提取核酸以获得更多的样品重新检测。然而，需要注意的是由于肿瘤的异质性，从肿瘤样本中重新提取的用于确认突变的核酸，也可能产生不同的结果。这种情况在近由CAP组织的一项KRAS测试中得到证实，这项测试（CAP2010 KRAS-B）的结果显示，2/3的参与实验室验证了样品的KRAS突变，而1/3的实验室却没有检测到。

这些检测到的测试结果的差异，可能是由于肿瘤的异质性造成的。去美国看病后，基因芯片是一种以寡核苷酸微阵列为基础的检测技术，该技术可在单个反应体系检测大量的RNA转录体，或鉴别基因拷贝数的变异。

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